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第六节 食物过敏诊断(第1页)

第六节食物过敏诊断

一、病史和临床检查

食物过敏最常发生于年幼儿,特别是异位性皮炎湿疹患儿,患者提供的病史通常不够准确,必须仔细记录饮食和临床症状的关系,有助于获取正确的信息。绝大多数食物过敏都是由相对少数的几种食物引起的,如果发现对3种以上不相关的食物过敏,则必须寻找这些食物的内在联系,是否存在交叉过敏的情况。大多数食物过敏症状在进食后数分钟~数小时内发生,对食物中的染料和添加剂过敏是存在的,但很少见。

二、皮肤试验

皮肤点刺试验(ski)是最初的筛选试验,比较敏感。欧洲变态反应和临床免疫学会推荐新鲜食物皮肤点刺试验(freshfoodpricktopricktest),这种“点刺-点刺”的方法比用制造商提供的食物变应原提取液试剂(ercialextract)更敏感。SPT已成为变应原标准化的推荐方法,在过敏诊断中的应用极为普遍,也是食物变应原生物活性评价的一个较合理方法。SPT合理性在于小量变应原经皮诱导产生典型的皮肤反应如水泡和红斑,在一定浓度范围内,测量红斑或水泡面积可用来定量变应原生物学活性,结果可用终点滴度(即产生阴性反应的最大浓度)或标准组胺相当活性(10mgmlhistamiprick,10HEP)表示。

SPT虽然简便易行,但患者必须符合进行实验的条件,如皮肤完整、未使用对皮肤反应有较大影响的药物,实验物质必须保证除了变应原特性外而不具传染性及毒性。皮试结果有时与病史并不完全一致,皮试阳性可能不出现症状,相反,一些阴性结果却出现过敏症状,因此,SPT试验要与血清学实验结合分析,以免不必要的食物限制。SPT对鱼、鸡蛋、牛奶等一些较明确的变应原有较高的敏感性和特异性,对一些未明确抗原的诊断准确性较低。

与SPT类似的还有斑贴试验,通过含变应原的贴片斑贴,观察皮肤反应进行诊断和检测。斑贴试验在诊断食物过敏上并没有SPT好。皮内试验特异性低,并且对高敏感的个体存在较大的危险性,所以欧洲和美国变态反应学会不推荐作为食物过敏的诊断方法。

三、组胺释放实验

组胺释放实验(histamiest,HRT)变应原激发致敏的靶细胞,引起细胞释放组胺,组胺含量可应用荧光测定法、放射免疫法等方法测定,与适宜参照进行比较,确定组胺释放率阳性标准,从而进行变应原活性测定及鉴定的一类方法。通常用抗IgE抗体作阳性参照,以样品介质为阴性参照,以排除实验过程中组胺的非特异性释放。此外,某些待测变应原或提取物本身含有组胺,并且待检变应原或其共存物可能具有靶细胞毒性,引起组胺非特异释放,因此必须设样品对照及非致敏靶细胞对照。

四、血清特异性IgE抗体测定

变应原与IgE结合是变应原发挥生物活性的中心环节,因此测定变应原特异性IgE在过敏症诊断及变应原评价中具有重要地位。自从IgE成功纯化及抗IgE抗体的制备后,放射变应原吸附实验(Radiosorbe)、酶联免疫吸附(Enzymelinkedallergosorbentassays,ELISA)及酶免疫法(EIA)等荧光和化学发光标记的检测技术均已建立。目前新技术不断推出,如RAST-CAP可检测的变应原有二三百种之多。血清中特异性IgE抗体测定在食物过敏的诊断上有较高的特异性,特别对检测鸡蛋、牛奶、鱼和花生等抗原和敏感性和特异性较高。

近年来,渐趋成熟的蛋白质芯片技术因其高通量、微型化、平行性检测等优点,正越来越多的应用于药物筛选、蛋白质组研究和临床检测等领域。由此衍生的变应原特异性IgE抗体检测芯片,具有样本血清量少,操作简便,价格低廉等优点,具有较强的临床检测使用价值,可能是未来诊断试剂的发展方向。

五、饮食回避和激发试验

首先告知患者记录症状2周,随后进行可疑食物回避2周,如果食物回避2周症状无明显改善,那么患者主诉症状未必与该食物有关,或许存在其他原因。如饮食回避后症状改善,进一步进行激发试验,包括开放性激发试验(ope)和双盲安慰剂激发试验(double-blirolgetest)。

双盲安慰剂激发试验是诊断食物过敏的“金标准”,能确定暴露于过敏食物与临床症状的因果关系。但该诊断方法不能确定具体的变应原,费用昂贵且耗时,因此较少用于人群调查研究。实验中最重要的是控制双盲、实验剂量和安慰剂。双盲要求媒介物能掩盖被检食物的味道、质地及气味,尽可能消除被检食物与安慰剂的细微差别,这样可能限制了食物的实验剂量,通过分离提取食物变应原中的有效成份作为激发物可弥补这一缺点。至今,实验中安慰剂的使用仍无国际统一标准,鉴于临床及研究的需要,急需对安慰剂进行标准化。研究显示,花生蛋白、鳕、鸡蛋及牛奶等食物变应原诱发过敏症状的剂量范围可达4~5个数量级,超出常规检测可操作的范围,如果反复试验则可能导致脱敏,得出错误判断。所以,在安全(要求慢慢增加实验浓度)和正确评价(要求级数增加实验剂量)之间有待确定适宜的方案。因此,虽然双盲安慰剂激发试验在诊断食物过敏中是一金标准,但结果受多因素影响,甚至包括心理反应而出现自发性症状。实践中也不易操作,实验剂量、安慰剂及双盲控制等环节还有待完善。

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